Anti-Flag亲和纯化凝胶 ——IP/蛋白纯化好帮手
Anti-Flag亲和纯化凝胶 ——IP/蛋白纯化好帮手 1产品概述 Anti-Flag亲和纯化凝胶（Anti-DYKDDDDK (Flag) Affinity Gel），主要用于带有Flag标签的融合蛋白免疫沉淀（IP）和纯化，其核心组分是抗体与凝胶组成的吸附剂。本产品选用高质量的鼠源IgG2b单克隆抗体，通过供价偶联的方式与Sepharose 4B gel形成紧密联系的吸附剂，能够特异性吸附Flag蛋白序列，得到高纯度的Flag标签蛋白。 « 目的蛋白载量高：载量≥1.1mg蛋白/mL凝胶 « 结合蛋白类型多：Met-FLAG–Protein，N端FLAG–Protein，C端FLAG-Protein « 填料质量硬：包被高质量的鼠源IgG2b单克隆抗体，浓度>7.5g抗体/L凝胶 « 性价比更高：进口一半的价格，一年节省50%科研经费 2产品原理 Anti-Flag亲和纯化凝胶的核心原理为亲和纯化技术：利用生物分子之间的特异性结合的作用进行生物物质的分离纯化，将鼠源IgG2b单克隆抗体与4%高度交联的琼脂糖凝胶通过供价偶联制备形成特异性吸附Flag蛋白序列的亲和吸附剂，将带有Flag标签的目的蛋白吸附到吸附剂上，然后选择合适的洗脱液将目的蛋白从吸附剂上解吸。具体流程图如下： 图1 Anti-Flag亲和纯化凝胶实验流程图 3产品优势 1）超高纯化效率 本产品具有超高的纯化效率，≥1.1mg蛋白/mL凝胶的载量，可满足所有实验要求。 图2 Yeasen Anti-Flag亲和纯化凝胶质检数据 Line 1：翊圣Flag-gel与E. coli裂解液混合纯化后电泳；Line 2：阴性对照 2）PK进口品牌S*M2 Flag-gel 高品质，高质量，与进口产品相比，同样不惧 图3 PK进口品牌S*M2 Flag-gel Line 1,2: 翊圣Flag-gel, 3×Flag peptide洗脱; Line 3,4: 翊圣Flag-gel, Gly-HCl洗脱; Line 5,6: S*M2 Flag-gel, 3×Flag peptide洗脱; Line 7,8: S*M2 Flag-gel, Gly-HCl洗脱 3）更高性价比 Yeasen致力于为您提供性价比最高的产品，Anti-flag亲和纯化凝胶可为您节约50%科研经费。 图4 Yeasen Anti-Flag亲和纯化凝胶产品与S品牌同级别产品价格比较 5常见问题 问题 可能原因 推荐解决方案 柱子反压过高 填料被堵塞 清洗树脂。 裂解液中含有微小的固体颗粒，建议上样前最好用0.22µm或0.45µm滤膜过滤，或离心去除。 样品太黏稠 样品中含高浓度的核酸，延长破碎时间直至粘度降低，或添加DNaseI （终浓度为5µg/ml），Mg2+(终浓度1mM)，冰上孵育10-15min 缓冲液太黏稠 有机试剂或蛋白稳定试剂（如甘油等）可能会引起反压增高，降低操作流速。 洗脱组分中无目的蛋白 Flag标签蛋白变性了 使用温和的裂解条件，实验条件以经验为准。 过度的裂解使目的蛋白变性 Flag多肽失效 更换Flag多肽 目的蛋白聚集产生沉淀 在细胞裂解前溶液中加入DTT，终浓度为1-10mM 融合蛋白改变了Flag的构象，影响了目的蛋白的结合力 测定pGEX中Flag的结合力，对载体进行超声处理，检测其结合力。如果载体中Flag有很高的亲和力，有可能是改变融合蛋白的构象从而降低了Flag标签蛋白的亲和力。 降低结合温度至4℃，充分清洗。 目的蛋白没有完全洗脱下来 洗脱体积太少 增加洗脱液体积，减小洗脱流速。 洗脱液中Gly-HCl的pH 发生改变 使用新鲜配制的洗脱液 洗脱液孵育时间不够 增加洗脱液与凝胶的孵育时间 电泳或western blot检测中发现多条带 Flag融合蛋白已经发生降解 在裂解液中加入蛋白酶抑制剂，如加入1 mM PMSF 可能是蛋白酶对目的蛋白部分降解造成的，可使用蛋白酶缺陷型宿主菌（如lon-或ompT） 细胞破碎过度 减少细胞破碎时间，超声前加入溶菌酶（菌液体积的0.1倍10mg/ml溶菌酶，25mM Tris-HCl，pH8.0），避免发泡导致蛋白酶变性，过度超声破碎增加宿主内源蛋白与Flag融合目的蛋白的共纯化。 抗体与E. coli的各种蛋白反应 抗体吸附E. coli蛋白：Flag-抗体；超声处理去除Flag抗体，可以用Western Blot检测 6订购信息 产品名称 产品编号 规格 价格（元） Anti-DYKDDDDK (Flag) Affinity Gel（Anti-Flag亲和纯化凝胶） 20584ES01 100 μL 856.00 20584ES03 1 mL 1936.00 20584ES08 5 mL 6236.00 20584ES25 25 mL 27286.00 20584ES60 100 mL 96756.00 7相关产品推荐 His标签蛋白纯化 产品名称 载量（/mL填料） 最大压力 产品编号 规格（mL） 价格（元） HisSep Ni-NTA Agarose Resin （His标签蛋白琼脂糖高速纯化树脂） ＞40mg 6×His-tagged protein 0.1MPa, 1bar 20502ES10/50/60 10/50/100/1000 678/2848/5328/42686 HisSep Ni-NTA Agarose Resin 6FF （His标签蛋白琼脂糖高速纯化树脂） ＞40mg 6×His-tagged protein 0.3MPa, 3bar 20503ES10/50/60/80 10/50/100/1000 798/3358/5838/44686 HisSep Ni-NTA 6FF Chromatography Column, 5mL （His标签蛋白纯化预装柱，5 mL） ＞40mg 6×His-tagged protein 0.3MPa, 3bar 20504ES08/25 728/2938 HisSep Ni-NTA 6FF Chromatography Column, 1mL（His标签蛋白纯化预装柱，1 mL） ＞40mg 6×His-tagged protein 0.3MPa, 3bar 20505ES03/08 1/5×1 298/1048 Anti-His Affinity Gel（Anti-His标签亲和纯化凝胶） ≥0.6mg蛋白 —— 20589ES03/08/25/60 1/5/25/100 4356/13756/62786/189756 GST标签蛋白纯化 产品名称 载量（/mL填料） 最大压力 产品编号 规格（mL） 价格（元） GSTSep Glutathione Agarose Resin 谷胱甘肽琼脂糖树脂（用于GST标签蛋白纯化） ＞20mg GST protein（40kDa） 0.1 MPa,1bar 20507ES10/50/60/80 10/50/100/1000 928/3848/6898/48686 GSTSep Glutathione Agarose Resin 4FF 谷胱甘肽高速纯化树脂（用于GST标签蛋白纯化） ＞10mg GST protein（40kDa） 0.3 MPa,3bar 20508ES10/50/60/80 10/50/100/1000 1238/4568/7928/54686 GSTSep Glutathione 4FF Chromatography Column,1mL（GST标签蛋白纯化预装柱，1mL） ＞10mg GST protein（40kDa） 0.3 MPa,3bar 20509ES03/08 1/5×1 328/1348 GSTSep Glutathione 4FF Chromatography Column,5mL（GST标签蛋白纯化预装柱，5mL） ＞10mg GST protein（40kDa） 0.3 MPa,3bar 20510ES08/25 1/5×1 938/3928 MBP标签蛋白纯化 产品名称 载量（/mL填料） 最大压力 产品编号 规格（mL） 价格（元） MBPSep Dextrin Agarose Resin 6FF （MBP标签蛋白高度交联纯化树脂） ＞10mg MBP蛋白（80kDa） 0.3 MPa,3bar 20515ES08/25 5/25 858/2958 MBPSep Dextrin 6FF Chromatography Column, 1 mL （MBP标签蛋白纯化预装柱，1 mL） ＞10mg MBP蛋白（80kDa） 0.3 MPa,3bar 20516ES03/08 1/5×1 358/1258 MBPSep Dextrin 6FF Chromatography Column, 5 mL （MBP标签蛋白纯化预装柱，5 mL） ＞10mg MBP蛋白（80kDa） 0.3 MPa,3bar 20517ES03/25 5/5×5 1238/3958 HA/Myc/V5标签蛋白纯化 产品名称 蛋白结合量（/mL填料） 产品编号 规格 价格（元） Anti-HA Affinity Gel（Anti-HA亲和纯化凝胶） ≥0.6mg蛋白 20586ES03/08/25/60 1/5/25/100mL 4356/13756/62786/189756 Anti-Myc Affinity Gel（Anti-Myc标签亲和纯化凝胶） ≥0.6mg蛋白 20587ES03/08/25/60 1/5/25/100mL 4356/13756/62786/189756 Anti-V5 Affinity Gel（Anti-V5标签亲和纯化凝胶） ≥1.1mg蛋白 20588 ES03/08/25/60 1/5/25/100mL 4356/13756/62786/189756 更多产品敬请详询400-6111-883 
地址：上海市浦东新区天雄路166弄一号楼三层南单元
联系人：李自转
电话：400-6111-883、021-34615995-8075
传真：021-34615995-188
Email：lizizhuan@yeasen.com
相关商家动态
- 2023/5/29 HonorGene腺病毒包装春季大促销
- 2023/5/26 通知 | 关于针式滤器包装规格变更的通知
- 2023/5/26 揭秘 | 生物样本库管理体系中转站
- 2023/5/26 重塑自身免疫的魔法——造血干细胞移植
- 2023/5/26 【阿拉丁】荣获2022年“上海市专利工作示范企业”称
- 2023/5/26 CD28——从免疫疾病靶点到T细胞耗竭指标
- 2023/5/25 【喜讯】北京百泰派克生物科技（BTP）有限公司 荣获
- 2023/5/25 热烈欢迎重庆市科技局、九龙坡区委常委、区科技局领
- 2023/5/25 CACLP丨第二十届中国国际检验医学会，菁良与您相约南
- 2023/5/25 校企合作 | 宿州学院工程技术学院与耐思生命校企合作