LabGreen(同GelGreen)(10000×)说明书

  • 来源:生物谷
  • 时间: 2022/8/10
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    LabGreen(同GelGreen)(10000×)说明书

    规格:500ul(10,000×水溶液)

    保存:2-8 度保存,有效期 2 年。

    Labgreen 使用方法:

    1.胶染法(用法同 EB)(推荐方法)

    制胶时加入 GelGreen 核酸染料。(例如:每 50mL 琼脂糖溶液中加入 5μL GelGreen10,000× 储液)。 按照常规方法进行电泳。 此方法染色染料用量相对较少。500μL 染料大约可以做 100 块 50mL 的胶。

    GelGreen 兼容所有常用的电泳缓冲溶液。如果条带弥散或分离不理想,建议使用泡染法染色,如果问题依旧存在,则说明问题与染料无关,请尝试:降低琼脂糖浓度;选用更长的凝胶;延长凝胶时间以保证边缘清晰;改进上样技巧或选择泡染法染色。对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。

    GelGreen 具有良好的热稳定性,可以在热的琼脂糖溶液中直接添加,也可以选择将 GelGreen 储液加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中,然后加热以制备琼脂糖凝胶。

    2.泡染法

    按照常规方法进行电泳。用水将 GelGreen(10,000×)储液稀释约 3,300 倍到 0.1M NaCl 中,制成 3× 染色液。(例如将 15μL GelGreen 10,000× 储液和 5mL 1M NaCl 加到 45mL H2O 中)。将凝胶小心地放入合适的容器中,如聚丙烯容器中。缓慢加入足量的 3× 染色液浸没凝胶。室温振荡染色 30min 左右。

    注:用泡染法染色时,染料用量较多。单次制备的染色溶液可重复使用 3 次左右。

    GelGreen 的特点:

    1. 无毒性:GelGreen 独特的油性和大分子量特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内,艾姆斯氏试验 结果也表明,该染料的诱变性远小于 EB。

    2. 灵敏度高:适用于各种大小片段的电泳染色,对核酸迁移的影响小于 SYBR Green I。

    3. 稳定性高:适用于微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶;室温下酸或碱缓冲液中极其稳定,耐光性强。

    4. 信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。

    5. 操作简单:在预制胶和电泳过程中染料不降解;而电泳后染色过程也只需 30 分钟且无需脱色或冲洗,即可直接用可见光凝胶透射仪观察。

    GelGreen 可选择电泳前染色(胶染法)或电泳后染色(泡染法);适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳;可用于 dsDNA、ssDNA 或 RNA 染色。与标准凝胶成像系统以及可见光激发的凝胶观察装置完美兼容:适用于使用 254nm 激发的紫外凝胶成像系统或可见光激发的凝胶观察装置。

    注意事项:

    用泡染法染色时,染料用量较多。单次使用的染色液可重复使用 3 次左右。3× GelGreen 染色液可以大量制备,在室温下避光保存直至用完。

    使用紫外成像仪,请选择 LabRed;使用激光成像仪或可见光下观测,请选择 GelGreen。

    尽管在凝胶染色方面,GelGreen 优于 SYBR Green I,但并不推荐在 qPCR 中使用 GelGreen 。对于qPCR,推荐专为 qPCR 设计的 SYBR Green I 及 EvaGreen。

    在极少数情况下,质粒经某些酶切后的 DNA 样品会出现拖尾和分辨率降低,此时建议同时尝试两种染色方法以决定哪种方法更加合适。

    本产品仅供科研使用.请勿用于医药,不能用于临床治疗诊断使用!

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