水土中总磷酸盐测试盒说明书(微量法)

  • 来源:生物谷
  • 时间: 2022/8/10
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    水土中总磷酸盐试剂盒说明书

     微量法 100T/96S

    注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

    测定意义

    总磷酸盐包含正磷酸盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、多聚磷酸盐等各种磷酸盐的形式,反应了水土中的磷酸盐水平,是一个水质和土壤质量评价的重要指标。

    测定原理

    在酸性溶液中,在分解剂和高温条件下,将无机磷酸盐和有机磷酸盐水解成正磷酸盐,正磷酸盐可与钼酸铵反应成磷钼酸,在还原剂存在时被还原为磷钼蓝,在 710nm 处有特征吸收峰。

    需自备的仪器和用品

    天平,震荡仪、常温离心机、酶标仪、96 孔板、蒸馏水。

    试剂组成和配制

    试剂一:液体 20mL×1 瓶,4℃保存。

    试剂二:液体 40mL×1 瓶,4℃保存。

    试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃避光保存。

    试剂四:粉剂×1 瓶,4℃保存。临用前加 4mL 蒸馏水充分溶解,然后将试剂五全部加入试

    剂四中充分混匀。

    试剂五:液体×1 支,4℃保存。

    样品处理

    1. 水样:按照水样体积(mL):试剂一体积(mL):试剂二体积(mL)为 10:1:2 的比例(建议取 1mL 水样,加入 100μL 试剂一和 200μL 试剂二)95℃沸水浴 30min,冷却后待测。

    2. 土样:按照土壤质量(g):蒸馏水体积(mL):试剂一体积(V):试剂二体积(V)=1:10:1:2(建议称取约 0.1g 土样,加入 1mL 蒸馏水,再加入 100μL 试剂一和 200μL 试剂二),95℃沸水浴振荡 30min,10000g ,25℃离心 10min,取上清液待测。

    测定操作表

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    计算公式
    标准曲线:y = 0.0237x + 0.0016,R2 = 0.9989;x 为 PO4 -浓度 μg/mL,y 为吸光值△A。
    1. 水样: 总磷酸盐含量(μg/mL)= (△A-0.0016)÷0.0237×V 样÷(V 样÷V 样总)
    = 54.8×(△A-0.0016)
    2. 土样: 总磷酸盐含量(μg/g)= (△A+0.0063)÷0.0489×V 样÷(W×V 样÷V 样总)
    =54.8×(△A+0.0063)÷W
    V 样:加入样本体积;0.04mL;V 样总:样本总体积,1.3mL;W,土样质量,g。
    注意事项
    1. 配制的试剂四一周内使用完。
    2. 检出限为 65μg/mL 或 65μg/g。
    仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。

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